期刊简介
本刊的办刊宗旨是：面向临床，注重循证，为提高儿科医生的临床和科研水平服务。《中国循证儿科杂志》以儿科医疗、科研和管理工作者为主要读者对象，以刊载体现循证医学理念和方法进行儿科学研究的成果为主的学术技术类期刊，同时也适当地介绍循证医学方法学。
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- 杂志名称：中国循证儿科杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学
- 国际刊号：1673-5501
- 国内刊号：31-1969/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
指甲游离缘及毛发中核DNA抽提方法的探讨
张弘；陈虹帆；安宇；王红艳；段文元
关键词：核DNA抽提, 指甲游离缘, 发根, 发干
摘要：目的 探讨指甲游离缘及毛发中抽提核DNA的方法,并对抽提结果进行评估.方法 采集5名健康成人志愿者指甲游离缘、发根及发干样本各30份.分别用无水乙醇和蒸馏水浸泡样本,去除外源性DNA.每份指甲游离缘样本为3 mg指甲游离缘碎片;每份发根或发干样本各为3段0.3～0.5 cm发根或发干.分别采用酚氯仿法、Chelex-100法和QIAamp(R) DNA Investigator试剂盒法抽提3种样本的核DNA,并运用PCR扩增对抽提DNA进行评估.扩增片段位于不同染色体上,长度分别为188、248、300和741 bp.PCR扩增产物用1.8%琼脂糖凝胶电泳检测.为探讨样本量对抽提结果的影响,任意取指甲游离缘1、3和5 mg,发根及发干各1、3和5根重复实验,并比较结果.初步探讨增加Taq酶量对黑色素抑制的消除作用.结果 在3种抽提方法中长度为248 bp的引物扩增成功率均为高.指甲游离缘样本使用试剂盒法抽提核DNA PCR扩增成功率显著高于酚氯仿法及Chelex-100法(P<0.05).发干样本使用试剂盒法抽提核DNA PCR扩增成功率显著高于酚氯仿法(P<0.05).发根样本3种方法抽提核DNA PCR扩增成功率差异无统计学意义(P>0.05).指甲游离缘样本的PCR扩增成功率显著高于发根及发干样本(P<0.05),发根和发干样本的PCR扩增成功率差异无统计学意义.试剂盒法抽提指甲游离缘、发根和发干核DNA PCR扩增成功率随样本量增加而提高.酚氯仿法和Chelex-100法抽提发根或发干样本核DNA PCR扩增成功率随样本量增加呈下降趋势,提示可能存在黑色素抑制作用.增加Taq酶量对于消除黑色素抑制有一定作用.结论 ①3种抽提方法均能成功从指甲游离缘及毛发中抽提到核DNA,试剂盒法成功率高.②指甲游离缘、发根和发干均可作为核DNA采样源,从指甲游离缘抽提DNA成功率高.
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