急性期川崎病γ干扰素组蛋白乙酰化改变及意义初探

摘要：目的：探讨急性期川崎病（ KD）患儿IFN-γ组蛋白乙酰化改变及其在KD免疫发病机制中的作用。方法以2015年2月至2016年6月深圳市儿童医院诊断并住院治疗的KD患儿为KD组，经IVIG治疗后为KD-IVIG组，KD组依冠状动脉有无损伤分为冠状动脉损伤（ KD-CAL＋）亚组和无冠状动脉损伤（ KD-CAL-）亚组，于IVIG治疗前、后取血备检；同期体检的健康儿童为对照组。采用染色质免疫共沉淀法检测外周血CD4＋ T细胞IFN-γ组蛋白H3乙酰化水平及组蛋白乙酰化酶 p300和去乙酰化酶 HDAC1／2结合水平；流式细胞术检测外周血 CD4＋ IFN-γ＋细胞（ Th1）比例及 IFN-γ、pSTAT4、pSTAT5和T-bet蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD4＋ T细胞IFN-γ、IL-2Rα/β、IL-12Rβ1/2、IL-18Rα/β和ITLR4 mRNA表达；ELISA检测外周血浆中IL-12、IL-2和IL-18浓度。结果①KD患儿38例（男20例），年龄1~5.2岁；KD-CAL＋亚组16例，KD-CAL-亚组22例。对照组32例（男17例），年龄1.2~4.9岁。KD组和对照组年龄、性别差异无统计学意义。②急性期KD患儿Th1细胞比例、IFN-γ mRNA和蛋白表达及其组蛋白乙酰化水平显著高于对照组（ P﹤0.05），且KD-CAL＋亚组高于KD-CAL-亚组（P﹤0.05），经IVIG治疗后明显恢复（P﹤0.05）。③急性期KD患儿CD4＋ T细胞IFN-γ组蛋白乙酰化酶p300结合水平显著增加（P﹤0.05），HDAC1／2结合水平明显降低（P﹤0.05），p300／HDAC1／2明显高于对照组且与IFN-γ组蛋白H3乙酰化水平呈正相关（ r=0.52；P﹤0.05），经IVIG治疗后均有所恢复（ P﹤0.05）。其中KD-CAL＋亚组p300结合水平及p300／HDAC1／2比值均高于KD-CAL-亚组（P﹤0.05），而HDAC1／2结合水平则低于后者（ P﹤0.05）。④急性期 KD 患儿血浆 IL-2、IL-12和 IL-18浓度显著增高（ P ﹤0.05），CD4＋ T 细胞表面受体IL-2Rα／β、IL-12Rβ1／2、IL-18Rα／β和TLR4及其下游信号分子pSTAT5、pSTAT4、T-bet和MyD88表达明显上调（ P﹤0.05），且KD-CAL＋亚组前述各项均高于KD-CAL-亚组（P﹤0.05），经IVIG治疗后均有不同程度恢复（P﹤0.05）。结论 IFN-γ组蛋白过度乙酰化可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要因素之一。